JEV:腺体来源的干细胞细胞外囊泡通过骨保护素和miR-21-5p缓解骨质疏松症

心血管疾病症是一种最常见的穿孔骼疾病，其主要原因是穿孔形成和穿孔游离失衡，导致穿孔组织定量丢失。干线粒体举例的线粒体外小泡(EVS)作为一种新型的无线粒体治疗药物，由于其要强个体干线粒体而受到越发多的注意，因此，探讨表皮举例的EVS在心血管疾病发作必要中的关键作用。

方法：采用基于切向流过滤(TFF)系统会的多重过滤系统会剥离ASC-EV，并用光强电镜、动态光反射、Zeta电位、流式线粒体璇、线粒体系数串列和酵素联免疫吸附试制对其透过表征。

结果：EVS富含与穿孔代谢和间充质干线粒体(MSC)移入涉及的内皮细胞和线粒体系数。特别是在是核系数受体激活剂κB底物的天然减缓剂便是护穿孔素在ASCEV中高度富集。我们推测静脉注射ASC-EVS可以减轻心血管疾病小鼠的穿孔丢失。ASC-EVS明显减缓巨噬线粒体的窜穿孔线粒体分化，促进穿孔髓间充质干线粒体(BM-MSCs)的移入。然而，OPG缺失的ASC-EVS没有显示出减缓窜穿孔线粒体生成的关键作用，这表明OPG对ASC-EVS的治果至关重要。此外，我们还对小分子RNA测序数据透过了分析，以确定与减缓心血管疾病涉及的miRNA候选DNA。Asc-EVS中的miR-21-5p通过减至Acvr2a来减缓窜穿孔线粒体的分化。此外，let-7b-5p在 ASC-EVs突出降低了窜穿孔线粒体形成涉及DNA的传达。ASC-EVS经静脉注射后到达穿孔组织，且时长较长。

图1 从人ASCs剥离的EVS(ASC-EVS)的特性。(A)ASC-EVS的经典和室温光强电子显微镜(TEM)位图。比例尺，100 nm(左)和50 nm(右)。(B)用动态光反射法测量ASC-EVS的厚度原产。(C)EV表面一个大(CD9、CD63和CD81)和内部复合物一个大(GM130和Calnexin)的流式线粒体术分析。(D)测算ASC-EVS的Zeta电位。ASC-EV的千分之Zeta电位为-16.3 mV

图2 赋予ASC-EVS可改善去卵巢小鼠的心血管疾病症表型。(A)具有别具特色的穿孔小梁锯齿形位图；(B)股穿孔三维重建位图。(c-h)股穿孔穿孔小梁微其本质的定量分析。首次治疗4周后，取用左侧股穿孔，用μCT测算穿孔小梁其本质指数。数据均数±标准差(n=6)。**p<0.001；*p<0.0001；##p<0.01；#p<0.001。BV，穿孔体积；BV/TV，穿孔体积百分比；TB。TH，穿孔小梁厚度；TB。否，穿孔小梁数量；SMI，其本质模型指数

图3 EV线粒体系数与穿孔代谢的亲密关系。(A)线粒体系数串列的别具特色红光位图。(1)皮质醇样内皮细胞-1、(2)白线粒体间质-17、(3)穿孔激活素、(4)穿孔其本质遭遇复合物-6、(5)穿孔其本质遭遇复合物、(6)穿孔桥复合物、(7)单核线粒体趋化复合物-1、(8)细胞内磁性复合物酵素-2、(9)细胞内磁性复合物酵素-3、(10)转化内皮细胞-β1、(11)坏死系数-α和(12)穿孔其本质遭遇复合物-7。(B)线粒体系数的千分之收入RGB切变。(C)酵素联免疫吸附试制(ELISA)测量OPG复合物传达。数据为千分之值±SD

结论:ASC-EVS中的OPG、miR-21-5p和let-7b-5p可减缓窜穿孔线粒体分化，减小穿孔游离涉及DNA的传达，提示ASC-EVS月内已是治疗心血管疾病的无线粒体治疗剂。

原文出处：

Lee KS, Lee J, Kim HK,et al.Extracellular vesicles from adipose tissue-derived stem cells alleviate osteoporosis through osteoprotegerin and miR-21-5p.J Extracell Vesicles 2021 Oct;10(12)